CASTENHOLZ TYE MEDIUM

Complete Medium

Mix aseptically 5 parts double strength Castenholz Salts (see below) with one part 1% TYE (see below) and 4 parts distilled water. Final pH of complete medium should be 7.6.

Heat and mix TYE solution, DI water (and agar if required, 3%). Autoclave at 121^°C.

Aseptically add salt solution.

Adjust for final pH 7.6

Castenholz Salts, 2X:

Nitrilotriacetic acid 0.2 g

Nitsch^,s Trace Elements (see below)                         2.0 ml

FeCl3 solution (0.03%)                                               2.0 ml

CaSO4 . 2H2O                                                           0.12 g

MgSO4 . 7H2O                                                           0.2 g

NaCl                                                                            0.016 g

KNO3                                                                          0.21 g

NaNO3                                                                        1.4 g

Na2HPO4                                                                    0.22 g

DI water                                                                       1000.0 ml 

Adjust pH to 8.2.

Filter sterilize prior to use. May be stored at 2-5^°C for one year.

Nitsch^, s Trace Elements:

H2SO4                                                                         0.5 g

MnSO4                                                                        2.2 g

ZnSO4                                                                         0.5 g

H3BO3                                                                         0.5 g

CuSO4                                                                         0.016 g

Na2MoO4                                                                    0.025 g

CoCl2 . 6H2O                                                              0.046 g

Distilled water                                                              1000.0 ml

Mix and add to salt solution

FeCl₃ Solution:

FeCl₃                                                                       0.03 g

DI water                                                                  100 ml

Mix and add to salt solution

1% TYE Solution:

Tryptone (BD 211705) 10.0 g

Yeast extract 10.0 g

Distilled water 1000.0 ml

Autoclave at 121^°C for 15 minutes.